M036原理
乳酸桿菌生長需要特別的營養,因而在非選擇性培養基上很難生長。
維生素測定用培養基用於維生素的微生物法測定。
該方法需要三種培養基:即維持培養基,用於保持菌種活力;接種培養基,用於測試菌液的製備;測定用培養基,用於待測維生素的定量。
維生素B12測定用培養基,不含維生素B12,但包含所有其他維生素和必要養分,
用於萊士曼乳酸桿菌(ATCC 7830)的生長。萊士曼乳酸桿菌(ATCC7830)作為測定用菌,
最早由Capp等人描述(1)並被美國藥典和美國分析化學家協會(AOAC)所推薦(2,3)。
用已知稀釋度的維生素B12標準品,可以製備標準曲線(2,3)。
測試菌液的製備是將將活化後的菌株接種到乳酸桿菌肉湯培養基中,
推薦在37°C 孵育24 小時,再離心、清洗、重懸於10 ml 生理鹽水中,
再通過濁度分析或酸度分析,確定生長反應。用維生素B12的濃度及對應的吸光度製作標準曲線。
用標準曲線可確定待測樣本中的維生素B12的濃度。
應非常小心地避免培養基和玻璃器具的污染。應使用潔淨的無去污劑的玻璃器具。
少量的外源物質的污染可能導致錯誤的結果。
用於接種的測定菌應在專用的培養基中培養。